隔离衣洁净度-微生物试验 YY/T 0506.7-2014方法

YY/T 0506.7-2014《病人、医护人员和器械用手术单、手术衣和洁净服 第7部分：洁净度-微生物试验方法》是针对手术单、手术衣和洁净服产品微生物清洁度测试的医药行业标准，以下是对该方法的详细介绍：

适用范围

• 该标准适用于手术单、手术衣和洁净服产品洁净度-微生物的评价，包括重复性使用产品和原材料的微生物负载评价。

试验原理

• 通过设定适宜的洗脱程序，采用袋蠕动法对试样上自然污染的微生物进行洗脱。

• 对洗脱液进行薄膜过滤，并对滤膜进行培养计数，得到试样上洗脱的微生物总数。

• 以产品接种的方式将一定数量的需氧芽孢接种到无菌的相同试样上，用相同程序进行操作，得到洗脱芽孢总数。

• 用接种芽孢总数和洗脱芽孢总数求得修正系数。

• 通过修正系数对试样上洗脱的微生物总数进行修正，从而确定试样的生物负载水平。

仪器及试剂

• 仪器：包括模板、匀浆器、过滤装置、无菌微孔滤膜（标称孔径0.45μm）、洁净工作台、生物安全柜、恒温培养箱、压力蒸汽灭菌器等。

• 试剂：包括萎缩芽孢杆菌ATCC9372、营养琼脂培养基平板、玫瑰红钠琼脂培养基平板、氯化钠注射液等。

试验方法

1. 试样制备：在洁净工作台中，以无菌操作的方式将供试产品折叠成五层，用模板裁取试样，取中间三层作为试样。

2. 试样洗脱：将试样投入无菌匀浆袋中，加入氯化钠注射液，设定匀浆器的洗脱参数进行洗脱。

3. 移入培养基：将洗脱液经无菌微孔滤膜过滤，将滤膜菌面朝上分别贴于营养琼脂培养基平板和玫瑰红钠琼脂培养基平板上。

4. 培养和计数：将营养琼脂培养基平板置于35℃恒温培养箱中培养3天，玫瑰红钠琼脂培养基平板置于28℃恒温培养箱中培养5天，逐日观察菌落生长情况并计数。

5. 结果计算：计算每个试样洗脱的菌落总数和3个试样洗脱的平均菌落数。