黄曲霉毒素B1
毒性:是目前已知的毒性Zui强、致癌力Zui高的霉菌毒素之一,主要严重损害肝脏,导致急性肝炎、出血性坏死、肝细胞脂肪变性和胆管增生。
危害:可引起畜禽生长迟缓、免疫力下降,甚至急性死亡。其代谢产物(如M1)可通过奶制品进入人体。
玉米赤霉烯酮
毒性:是一种类雌激素样毒素,主要破坏动物的生殖系统。
危害:导致母猪外阴红肿、假发情、流产、死胎;引起公猪睾丸萎缩、性欲减退;对禽类则导致泄殖腔红肿、产蛋率下降。
对饲料原料和成品进行这两种毒素的监控,是保障畜牧业安全生产和动物源性食品安全的前提。
在中国,饲料中霉菌毒素的检测主要遵循以下强制性国家标准:
GB 13078-2017 《饲料卫生标准》
这个标准规定了各种饲料中黄曲霉毒素B1和玉米赤霉烯酮的限量指标。检测结果必须低于此限值才算合格。
GB/T 30955-2014 《饲料中黄曲霉毒素B1的测定 免疫亲和层析净化高效液相色谱法》
GB/T 28716-2012 《饲料中玉米赤霉烯酮的测定 免疫亲和层析净化高效液相色谱法》
上述两个方法标准是仲裁法和推荐方法,代表了Zui高的准确度和性。
目前主流的方法是高通量的仪器分析法,其核心步骤高度相似,主要在前处理的净化环节和仪器检测的参数上有所区别。
方法一:免疫亲和层析净化-高效液相色谱法
这是国家标准方法,结果Zui准确,用于jingque定量和仲裁。
原理:
提取:用特定的有机溶剂(如乙腈-水或甲醇-水溶液)振荡提取粉碎后的饲料样品,将毒素从基质中溶解出来。
净化与富集:使提取液通过专用的免疫亲和柱。柱内填充的抗体能特异性地识别并捕获黄曲霉毒素B1或玉米赤霉烯酮,而其他杂质则被冲洗掉。
洗脱:用纯甲醇将结合在柱上的毒素洗脱下来,得到高度纯净且浓缩的样品溶液。
检测:将洗脱液注入高效液相色谱仪进行分离和检测。
黄曲霉毒素B1:通常使用荧光检测器,因其具有天然荧光,检测灵敏度极高。
玉米赤霉烯酮:也可使用荧光检测器,或在紫外检测器下进行检测。
优点:特异性强、灵敏度高、准确性好、抗干扰能力强。
缺点:成本较高,耗时较长,对操作人员技术要求高。
方法二:酶联免疫吸附测定法
这是一种快速筛查方法,在基层和现场应用广泛。
原理:基于抗原抗体特异性反应。在试剂盒的微孔板上包被有抗体,加入样品提取液和酶标记物竞争反应,通过显色程度与标准曲线对比,计算出毒素含量。
优点:快速、简便、成本低、一次可处理大量样品。
缺点:是一种半定量方法,准确度和精密度低于色谱法,易出现假阳性或假阴性,通常用于初步筛查,阳性结果需用色谱法确认。
方法三:液相色谱-串联质谱法
这是Zui先进、Zui的确认方法,可用于多种毒素检测。
原理:在高效液相色谱分离后,使用串联质谱仪进行检测。通过母离子和子离子的信息,对毒素进行jingque的定性定量。
优点:灵敏度极高、特异性Zui强、可检测几十种甚至上百种霉菌毒素。
缺点:仪器非常昂贵,运行和维护成本高,需要dingji专业技术人员操作。
| 法定代表人 | 周乐辉 | ||
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